《靓妹有难》是一部典型的美式校园性喜剧，故事围绕五个性格迥异的男生展开。他们因一场关于“贞洁公主”Busch的赌约，被恶作剧般关进学校一间废弃小屋，由此拉开了一整天的荒诞闹剧。Rick是个满脑子馊主意的家伙，他穿上偷来的医生白大褂，假借“新生体检”之名，对刚入校的女生进行“特别检查”，闹出一连串让人捧腹的误会。Brent则是个书呆子，在法语课上因一次意外被当众揭穿“性单纯”，成为全校笑柄，而他的情感纠葛也越发复杂。Melvin是这群人中最害羞的一个，却在追爱路上屡出洋相，甚至被卷入一场啼笑皆非的三角关系。随着赌约时间逼近，五个男生必须联手应对校长的追查、女生的反击以及彼此间的内讧。在这场充满荷尔蒙与恶作剧的混战中，他们逐渐意识到，真正的“难”并非如何赢得赌约，而是如何面对自己的幼稚与成长。影片以夸张的肢体喜剧、密集的荤段子和青春期的懵懂冲动，展现了美式青春喜剧特有的无厘头魅力，最终在狂欢与和解中落下帷幕。